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ELISA常见问题：

1.加样量不一致？

解决方法：样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。

2.样品数量多少不一，加样时间有长有短？

解决方法：重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近。

3.保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致？

解决方法：重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性。

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。

Elisa实验常用方法： 

双抗体夹心法测定抗原 

将抗原免疫第一种动物获得的抗体吸附于固相表面;

加抗原，形成抗原-抗体复合物; 

加抗原免疫第二种动物获得的抗体，形成抗体抗原抗体复合物;

加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体); 

加底物。底物的降解量＝抗原量。

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